В наше время вопрос родственных связей стоит достаточно остро, а установление отцовства по ДНК — это популярная процедура, дающая возможность выявления всей правды, касающейся рождения ребёнка.
К сожалению, многие могут сомневаться в том, что данный метод действительно работает, а сделать ДНК тест не так уж и сложно. На самом деле, специалисты в клинических условиях способны определить связь между людьми не только по анализу крови, но и по ногтю или, например, волосу. Давайте проясним основные вопросы, касающиеся данного процесса, и отметим, как проходит .
Сразу упомянем, что суть данного метода строится на наличии у любого человека уникальнейшего набора информации генного уровня. Подобная информация позволяет ему развиваться, начиная от процесса оплодотворения и заканчивая взрослым организмом, она располагается на нити ДНК, а точнее, на 46 хромосомах человека. Отметим и то, что практически все клетки организма содержат такую информацию, поэтому они позволяют даже воссоздавать основные признаки личности.
Стоит прояснить и момент, связанный с появлением подобной информации. Дело в том, что она переходит плоду из половых клеток, которые были использованы для зачатия. Как вы могли понять, половину генетической информации ребёнок получает от матери, а другую половину — от отца, поэтому стоит понимать, что комбинирование хромосом происходит в случайном порядке, то есть активны могут быть совершено различные гены.
Важно понимать, что судить об измене со стороны жены из-за значительно отличающегося внешнего вида ребёнка нельзя, но если подозрения всё же возникают, то лучшим решением будет проведение специального теста на отцовство.
Специалисты утверждают, что для точного установления родственной связи между двумя людьми (в нашем случае — между отцом и ребёнком) необходимо в обязательном порядке получить генетический материал и от одного, и от другого.
Что же касается проведения теста в идеальных условиях, то подобный вариант предполагает дополнительное участие матери в тесте, чтобы исключить неточности, шанс которых всё равно мал. Мать в подобном исследовании нужна для того, чтобы выделить у ребёнка те гены, которые он получил именно от неё, тогда работать с результатами отца будет гораздо проще.
Отметим, что под словосочетанием «биологический материал» кроются следующие генетические материалы:
Несмотря на это, специалисты чаще всего прибегают к другому варианту, речь идёт про взятие клеток со слизистой оболочки, располагающейся на внутренней поверхности щёк (для этого достаточно просто провести ватной палочкой по рассматриваемому месту). Дело в том, что подобная процедура точно не вызовет никакого дискомфорта даже для малыша, а также её вполне можно проводить и не в лабораторных условиях, что делать крайне не рекомендуется.
Упомянем про популярность тестов на отцовство, проводимых частично в домашних условиях, но прибегать к их использованию мы крайне не советуем. Под таким названием кроется процедура взятия генетического материала прямо в домашних условиях, конечно, про кровь не может и идти речь, ведь дома можно взять только ноготь, волос или содержимое носа.
После взятия подобных проб в домашних условиях они отправляются в лабораторию, где специалисты исследуют полученные образцы, но подобный вариант не стоит рассматривать всерьёз, так как установить отцовство или опровергнуть его не получится (исследование точно не будет иметь какой-либо юридической силы).
Обратите внимание! Если предполагаемый отец отказывается делать подобный тест биологического материала, то в некоторых ситуациях вы будете иметь право заставить его сделать это посредством обращения в судебные органы!
Для того чтобы начать проведение подобного , вы должны подписать специальный договор о предоставлении личных биологических материалов для анализа. В некоторых ситуациях требуется подписание и других заявлений, особенно это важно при решении вопроса через суд.
После подписания договоров и сдачи биологических материалов специалисты в лабораторных условиях начнут выделять ДНК из биологического материала и проводить полимеразно-цепную реакцию. Она поможет провести тест огромного количества генов вне зависимости от размера образца. После этого специалисты начнут сравнение образцов при помощи специальных приборов, которые способны улавливать даже крошечные различия.
Упомянем, что подобное установление отцовства чаще всего проводится с использованием 16, 20, 24 генетических маркеров, которые являются стандартом во всех лабораториях по всему миру. Заключение лаборантов обязательно должно подтверждаться заведующим, способным гарантировать точность и правильность всех анализов.
Осталось разобрать только варианты проведения подобных тестов ДНК: стандартный вид исследования предполагает участие только ребёнка, а также предполагаемого его отца, этого вполне достаточно для сравнения биологического материала. Некоторые стремятся привлечь к исследованию ещё и мать ребёнка, но это совершенно необязательно (трио, а именно так называется исследование с участием матери, предполагаемого отца и самого ребёнка, поможет только максимализировать достоверность теста).
5 15 487 0
Тест на отцовство проводят для того, чтоб определить? имеется ли какое-то родство ребенка и мужчины.
Такие экспертизы проводят, дабы удовлетворить неуверенность отца либо чтобы добиться алиментов от бывшего мужа.
Метод не очень надежный, да и многие любят судить именно по разным элементам внешности.
Внешность передается на генетическом уровне, но ребенок может с возрастом измениться.
Есть люди просто похожие друг на друга. Цвет глаз, волос, конфигурация лица или губ не могут точно подтвердить отцовство.
Если у женщины за месяц были несколько половых партнеров, то можно попытаться припомнить конкретную дату.
Чаще всего оплодотворение происходит за неделю до овуляции и в течение 3 суток.
У дам со стандартным менструальным циклом овуляция случается на 14 день от наступления месячных. Тем не менее, как показывает практика, все четко по графику случается не у всех, поэтому возникают трудности с точным числом.
Стоит учесть то, что сперматозоиды в женском организме способны жить от трех до пяти дней. Оплодотворение могло случиться и в день полового акта, и спустя какое-то время.
Группа крови детей зависит от генов матери и папы. Такая проверка не показывает стопроцентную вероятность, и используется перед скрининговой экспертизой ДНК. Но если посмотреть со стороны резусов, то у родителей с положительным вполне возможно рождение ребенка с любым резусом. У родителей с резусом отрицательным появляется ребенок только резус-отрицательный. Именно в данном случае наверняка определяют отцовство. Эти исследования проводят после появления малыша на свет.
Есть специальные таблицы, разработаны врачами, которые показывают примеры совпадений при зачатии:
Слепо верить этому не стоит, так как вероятность достоверности достаточно низка.
Биологи научились считывать генетический ДНК-код ребенка и ДНК-шифр родителей. В период зарождения у эмбриона складываются молекулы ДНК от обеих родителей. Половина – от отца, половина – от матери. Во время экспертизы лаборанты берут участок и сравнивают код ДНК вероятного папы и его ребенка, и уже с большой точностью смогут подтвердить или оспорить генетическое родство.
Установить можно либо в суде, либо в добровольном порядке.
Если мужчина отказывается подтвердить или опровергнуть свое кровное родство, тогда выход только через судебные иски. Особенно это касается пар, которые жили в неофициальном браке.
Суд может назначить ДНК-тест для истинного подтверждения отцовства. При нежелании партнера проходить экспертизу, на судебном процессе будет вынесено решение на основе других доказательств.
Есть еще вариант анонимного теста ДНК. Вы можете сами собрать нужный биологический материал и отнести на экспертизу.
Но имейте в виду, такой результат не имеет никакой юридической силы. Специалист не может быть уверен, у кого вы брали образцы для анализа.
Нужно от отца и от чада генетический материал. Раньше для определения призывали сдать только кровь из вены. Теперь наиболее популярным является забор анализа из слизистой ротовой полости (за щекой).
Данный метод приветствуется тем, что его может выполнить каждый даже в домашних условиях.
Это процедура безболезнена как для взрослого, так и для ребенка. Нужно всего лишь ватной палочкой провести по внутренней стороне щеки.
Сейчас подобную генетическую экспертизу выполняют также по слюне, волосам, ногтям, зубам и т.д. Все без исключения образцы можно найти на расческе, зубной щетке, одежде, бритве и даже не потухшей сигарете. Если нужно определить отцовство по волосу, то он должен быть только с луковицей. Состриженная волосинка не подойдет. Именно в луковице сохраняется вся генетическая информация. Их должно быть около 10 штук.
Примерно исследование обходится в 7000 рублей.
Цены зависят от числа соучастников. Для ребенка и предполагаемого отца эта сумма, вероятно, будет около 5000 рублей. На случай, если берутся на экспертизу образцы и от биологической матери, то стоимость вырастет до 8000 рублей.
Для более точного результата исследуют 25 или 33 маркеров, и здесь цена процедуры, естественно, увеличится на 7000 рублей к стандартной сумме за анализ.
Если результат анализа нужен срочно и со всеми составляющими, цена будет около 26000 рублей. В среднем по времени экспертиза делается 14 дней.
Многие интересуются, можно ли генетическое тестирование пройти бесплатно. К сожалению, даже если отцовство подтверждать через суд, то оплачивать его будет истец. За счет государства узнать, чей это ребенок, невозможно.
Некоторые люди даже в век технологий не доверяют анализу и не могут понять, как, например, слюна, может показать биологическое отцовство.
В лабораториях все исследования проводятся на специальных оборудованиях, которые исключают ошибку биолога.
Человек имеет 46 хромосом. Малыш собрал поровну и от мамы, и от папы, но хромосомы выстраиваются в хаотическом порядке.
Исключительно в лабораториях можно рассмотреть нить ДНК и сравнить участки ребенка и родителя. Подлинность таких результатов стопроцентная.
ДНК тестирование является передовой методикой, которая позволяет с высокой точностью провести анализ ДНК узнать родственную связь, предрасположенность к различным заболеваниям, принадлежность к определенной этнической группе. Данный вид исследований проводится в условиях сертифицированной лаборатории «ДТЛ» , сдать образцы биоматериала можно как в самой Лаборатории Москвы , так и в её официальных представительствах.
При этом клиенты часто задают вопрос: как сделать тест ДНК в домашних условиях и что для этого необходимо ? Поскольку для анализа чаще всего используются образцы буккального эпителия, то забор такого материала можно произвести самостоятельно. Единственное условие – использовать рекомендуемые материалы и строго следовать инструкции.
Итак, можно ли сделать ДНК-тест в домашних условиях ? Непосредственно генетическое исследование проводится в лабораторных условиях опытными экспертами. А забор образцов биоматериала вполне возможно провести самостоятельно.
Подробная инструкция поможет сделать это быстро и правильно :
Таким образом, производится забор проб буккального эпителия для проведения генетической экспертизы. Процедура занимает в среднем 4-5 минут , является безболезненной и абсолютно безопасной для взрослых и детей, собранных образцов вполне достаточно для проведения полноценного ДНК теста на отцовство в Москве и многих других анализов .
Следует отметить, что если необходимо провести тест на отцовство во время беременности , то для этого требуется не только образец буккального эпителия, но также кровь матери. Детальней об этом вы можете узнать у консультантов нашего сайта .
Если Вы не имеете возможности посетить нашу Лабараторию или её официальное представительство, то можете взять образец ДНК дома , соблюдая инструкцию. Если все сделано правильно, то в результате исследования можно не сомневаться, он будет абсолютно достоверным и объективным. Точность результата составляет до 100,0%.
Если Вам потребуется консультационная помощь – обратитесь к нашим специалистам по указанным телефонам и получите подробные ответы на все интересующие вопросы.
Для взятия образцов можно использовать аптечные ватные палочки, но мы рекомендуем заказать специальный фирменный набор для самостоятельной процедуры . Оформить заказ можно прямо на сайте нашей Лаборатории и абсолютно бесплатно. Наши консультанты, в случае необходимости, окажут профессиональную помощь.
ДНК в домашних условиях
Наследственность, гены, ДНК... Кажется, эти слова уже давно перестали быть научными терминами, вошли в повседневную жизнь и знакомы теперь каждому старшекласснику, не говоря уж о студентах. Но никакой ДНК большинство из нас никогда не видело, хотя увидеть ее - дело вполне реальное даже в домашних условиях. В одной из генетических лабораторий на стене висит, к примеру, вот такая инструкция:
Как самому выделить ДНК.
1. Возьмите что-то, что содержит много ДНК. Например, фасоль (но можно свиную печень, рыбные молоки или редиску).
2. Положите в миксер около 100 мл (полстакана) этого продукта, добавьте 1/8 чайной ложки соли и 220 мл (стакан) холодной воды. Взбивайте в течение 20 секунд. Миксер «сварит» вам фасолево-клеточный суп.
3. Процедите смесь через ситечко или кусок марли или капрона (чулок вполне подойдет).
В полученную мякоть добавьте 1/6 от ее количества (это будет примерно 2 столовые ложки) жидкого моющего средства (для посуды, например) и хорошо размешайте. Оставьте на 8-10 минут.
4. Разлейте жидкость по стаканам или другим стеклянным посудинам, чтобы в каждой было заполнено не больше 1/3 объема.
5. Добавьте в каждую пробирку по чуть-чуть либо сока, выжатого из ананаса, либо раствора для контактных линз и осторожно встряхните, переворачивая и наклоняя пробирку (если будете трясти слишком рьяно, разломаете ДНК и ничего не увидите).
6. Наклоните пробирку и медленно влейте в нее немного этилового спирта, чтобы он образовал слой поверх фасолевой смеси. Лейте, пока спирта и смеси не окажется поровну. ДНК всплывет наверх в виде хлопьев.
7. Деревянной палочкой (карандашом) выловите их и рассмотрите под микроскопом.
Для научных работников эта инструкция - в какой-то степени шутка и никто из них ДНК таким способом не выделяет, а между тем если и вправду воспользоваться ею, то все получится! Выход ДНК будет, правда, невелик, а вещество - не особенно чистым, но увидеть в микроскоп длинные тонкие нити - кристаллы ДНК - вполне возможно.
Что же происходит с фасолью или свиной печенью в процессе описанных манипуляций и почему в конечном счете ДНК оказывается отделенной от всех остальных веществ, которых в клетке великое множество?
1.Выбор объекта.
ДНК, как известно, есть в каждой клетке, а значит, выделить ее можно из любой ткани - даже из костей животных, чешуи рыб или древесины, где клеток не так уж много по сравнению с объемом внеклеточного вещества.
Во всех тканях организма как животного, так и растения, ДНК, как правило, одинакова. Отличаются эти ткани тем, что в одних из них помимо вещества наследственности больше почти ничего нет (молоки селедки), а в других, таких, как костная ткань, содержание ДНК относительно невелико.
В общем, если перед исследователем не стоит какой-то специальной задачи, он старается выбрать для работы ткань, в которой мало межклеточного вещества и много самих клеток. Причем желательно, чтобы ткань легко распадалась на эти составляющие, а клетки не были перегружены белками (как мышечные), липидами (как жировые) или полисахаридами (как клетки мозга).
2. Дробим ткань на клетки.
В миксере ткань, из которой мы собираемся добыть вещество наследственности, распадается на отдельные клетки: чтобы механически разорвать связи между ними требуется, как правило, гораздо меньше усилий, чем для того, чтобы повредить саму клетку. И поскольку при нашем способе выделения ДНК требуются более или менее целые, неповрежденные клетки, ясно, что консервированный горошек, кукуруза или соленая селедка для такого эксперимента не годятся, - лучше уж взять что-нибудь свежезамороженное, если вы уверены, что продукт не размораживали в процессе хранения несколько раз.
А немного соли нужно добавить в раствор для того, чтобы клетки не полопались раньше времени: давление внутреннего содержимого на клеточную мембрану изнутри уравновешивают давлением соляного раствора снаружи.
3. Высвобождаем макромолекулу
Что касается фильтрации, то она нужна для того, чтобы механически удалить из клеточной суспензии всевозможные примеси, в том числе, крупные куски ткани - все равно те вещества, которыми мы собираемся обрабатывать смесь, не смогут проникнуть глубоко внутрь таких конгломератов, и для выделения ДНК они окажутся бесполезными.
А обработать
полученные клетки следует, в первую очередь,
каким-нибудь детергентом. Средство «Ферри», способное,
согласно рекламе, легко отмыть самую жирную посуду,
годится и для того, чтобы наделать больших дырок в
липидной мембране как самой клетки, так и ее ядра. Если
нет жидкого моющего средства, можно сделать
концентрированный раствор стирального порошка - тоже
подойдет.
В результате такой обработки все клеточное содержимое
вывалится наружу и окажется в растворе, который
сделается при этом очень вязким, тягучим и существенно
более прозрачным, чем была клеточная суспензия.
Изменение консистенции раствора - верный знак того, что
лизис прошел успешно.
4. Тут все ясно и без комментариев -
не наливайте слишком много раствора в емкость, туда предстоит еще много чего налить, к тому же, если смеси будет в избытке, ее будет трудно перемешать.
5. Освобождаемся от белков
Чего только нет в нашей смеси! Однако белков здесь - больше всего, причем именно они образуют самые прочные комплексы с ДНК. Существуют методики, когда белки удаляют из раствора в несколько этапов. Например, часть из них легко денатурирует и выпадает в осадок при добавлении концентрированных растворов солей. В лабораторных условиях такие приемы прекрасно работают, а от осадка исследователи освобождаются, помещая пробирки на несколько минут в центрифугу.
Мы сразу же перейдем к очистке ДНК от остаточных белков с помощью специальных ферментов, способных разрушать эти молекулы. Именно такие вещества содержит сок ананаса. Сами они - тоже белки, поэтому ананас, из которого выжимают сок, должен быть свежим: у ферментов нет ни малейшего шанса сохраниться неизменными в компоте или в консервированном продукте. Что же касается раствора для очистки линз, то если вы собираетесь использовать его - не забудьте положить таблетку для удаления белковых отложений! Сами по себе растворы для хранения контактных линз никаких активных веществ не содержат - иначе и нашим глазам не поздоровилось бы.
О том, что ферменты сработали, можно судить по уменьшению вязкости раствора. Если этого не происходит, поместите смесь в теплое место (примерно 37C) на полчаса, иногда может потребоваться добавить больше ананасового сока или раствора для очистки линз.
6. Осаждаем ДНК из раствора
Теперь ДНК плавает в растворе сама по себе. Белки больше не цепляются за нее, хотя обломков всевозможных молекул в смеси по-прежнему много. В лабораторных условиях эти ненужные фрагменты убирают, тщательно перемешивая раствор с фенолом и/или хлороформом. После центрифугирования внизу пробирки оказываются фенол и/или хлороформ с растворенными в них белками, а вверху - водная фаза, содержащая ДНК. Водную фазу собирают в отдельную пробирку и дальше работают уже с относительно чистым раствором.
За неимением центрифуги и органических растворителей, работа с которыми требует к тому же специальных мер безопасности, этот этап очистки в домашних условиях приходится пропустить и осаждать ДНК прямо из «грязного» раствора.
Заметим сразу -
заменить этиловый спирт водкой или духами нельзя: если
концентрация спирта будет низкой и упадет при смешивании
с водной фазой до 60-65%, ДНК в кристаллическое
состояние не перейдет.
Отчасти именно по этой причине наливать спирт в пробирку
с ДНК-содержащей смесью следует осторожно, наслаивая его
сверху. Тогда нижние слои спирта частично смешаются с
раствором ДНК, начнется процесс кристаллизации
нуклеиновых кислот, и они всплывут на поверхность (где
спирт более концентрированный) в виде хлопьев.
Если же налить спирт сверху не получится и все безнадежно перемешается, то при малом количестве этанола у вас вообще ничего не получится, а при большом начнет кристаллизоваться не только ДНК: в осадок выпадут и остатки белков, и кое-что еще из исходного содержимого клеток.
7. Что же мы получили? (см.рисунок ниже)
Чистые кристаллы ДНК похожи на клубки спутанных нитей, но не надо забывать, что вы видите именно кристаллы вещества, а не его макромолекулы, и сказать по их внешнему виду, какие гены содержит выделенная вами нуклеиновая кислота, конечно, невозможно. Чтобы узнать это, придется снова растворять ДНК. Впрочем, «прочесть» последовательность нуклеотидов в домашних условиях, увы, невозможно: для этого нужны не только специальные приборы, но и дорогие реактивы.
Однако если вы уже хорошо рассмотрели кристаллы и они успели подсохнуть, можете понаблюдать за тем, как ДНК растворяется. Она в начале набухает, становясь похожей на студенистую медузу, и лишь спустя несколько дней раствор делается однородным.
Процесс можно ускорить, если пробирку почаще встряхивать.
Желаю успехов начинающим генетикам и молекулярным биологам!
Материал подготовил: учитель биологии НОУ СОШ «ВЕНДА» Ледуховский Н.В.
